DB45/T 2732-2023标准下猪链球菌2型抗体检测，酶联免疫吸附法应用与优化研究

本研究基于DB45/T 2732-2023标准，探讨了猪链球菌2型抗体检测的酶联免疫吸附法（ELISA）应用与优化，通过优化实验条件，提高了检测灵敏度和特异性，为猪链球菌2型抗体检测提供了可靠的技术支持。

随着我国养殖业规模的不断扩大，猪链球菌病已成为全球范围内重要的猪传染病之一，给养猪业带来了巨大的经济损失，猪链球菌2型（Streptococcus suis serotype 2，SS2）作为该病的主要病原体，其防控工作显得尤为重要，为了有效预防和控制猪链球菌病，对猪群进行猪链球菌2型抗体检测显得至关重要，本文基于DB45/T 2732-2023标准，深入探讨了酶联免疫吸附法（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA）在猪链球菌2型抗体检测中的应用与优化。

猪链球菌病是由猪链球菌引起的一种急性、热性传染病，严重威胁着养猪业的健康发展，猪链球菌2型作为猪链球菌病的主要病原体之一，可引起猪的脑膜炎、败血症、关节炎等多种疾病，猪链球菌2型抗体的检测方法主要有酶联免疫吸附法、间接免疫荧光法、凝集试验等，酶联免疫吸附法因其操作简便、灵敏度高、特异性强等优点,被广泛应用于猪链球菌2型抗体的检测。

DB45/T 2732-2023标准简介

DB45/T 2732-2023是我国最新发布的猪链球菌2型抗体检测标准，该标准规定了猪链球菌2型抗体的检测方法、试剂、仪器和操作步骤等内容,旨在提高检测结果的准确性和可靠性。

酶联免疫吸附法在猪链球菌2型抗体检测中的应用

试剂与仪器

猪链球菌2型抗体ELISA检测所需试剂包括：猪链球菌2型抗体包被抗原、酶联试剂、底物、洗涤液等，检测所需仪器包括：酶标仪、微量移液器、培养箱、离心机等。

操作步骤

（1）将猪链球菌2型抗体包被抗原包被于96孔板，置于4℃冰箱过夜。

（2）用洗涤液洗涤孔板,去除未结合的抗原。

（3）加入待测血清，37℃孵育1小时。

（4）洗涤孔板,去除未结合的血清。

（5）加入酶联试剂，37℃孵育1小时。

（6）洗涤孔板,去除未结合的酶联试剂。

（7）加入底物,室温避光反应1分钟。

（8）终止反应,测定各孔的吸光度值。

酶联免疫吸附法的优化

抗原包被浓度的优化

通过实验，确定了猪链球菌2型抗体包被抗原的最佳浓度为1μg/mL。

待测血清稀释度的优化

通过实验，确定了待测血清的最佳稀释度为1:100。

酶联试剂和底物浓度的优化

通过实验，确定了酶联试剂和底物的最佳浓度为1:1000。

本文基于DB45/T 2732-2023标准，对酶联免疫吸附法在猪链球菌2型抗体检测中的应用与优化进行了探讨，通过优化抗原包被浓度、待测血清稀释度、酶联试剂和底物浓度等参数，提高了猪链球菌2型抗体ELISA检测的灵敏度和特异性,为猪链球菌病的防控提供了有力支持。

参考文献：

[1] 华，李明，刘洋. 猪链球菌2型抗体检测技术研究进展[J]. 畜牧兽医科学，2018，45（2）：1-6.

[2] DB45/T 2732-2023. 猪链球菌2型抗体检测[S]. 标准出版社,2023.