猪伪狂犬病gB蛋白磁微粒化学发光抗体检测方法研究进展
本研究针对T/CVMA 173-2024标准，研发了猪伪狂犬病gB蛋白磁微粒化学发光抗体检测方法，该方法具有高效、灵敏、特异性强等特点，为猪伪狂犬病抗体检测提供了新的技术手段。
随着我国畜牧业的迅猛发展，猪伪狂犬病（Pseudorabies, PRV）已经成为养猪业的一大挑战，猪伪狂犬病（Pseudorabies virus, PRV）是一种单股RNA病毒，感染后可引发猪只出现高热、呼吸困难、神经症状等症状，严重时甚至导致猪只死亡，为了有效控制猪伪狂犬病，提升猪只养殖效益，本研究依据T/CVMA 173-2024标准,对猪伪狂犬病gB蛋白磁微粒化学发光抗体检测方法进行了创新性研发与应用研究。
研究背景
T/CVMA 173-2024标准是我国首部针对猪伪狂犬病抗体检测的行业标准，该标准明确了猪伪狂犬病gB蛋白磁微粒化学发光抗体检测方法，此方法以其高灵敏度、强特异性和简便的操作流程等优势,适用于猪伪狂犬病抗体的检测。
研究方法
试剂与仪器
本研究选用猪伪狂犬病gB蛋白作为抗原，制备磁微粒标记的gB蛋白抗体，主要试剂包括：猪伪狂犬病gB蛋白、磁微粒、抗猪伪狂犬病gB蛋白抗体、辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG、化学发光底物等，主要仪器包括：酶标仪、搅拌器、离心机、冰箱等。
磁微粒标记gB蛋白抗体
- 将猪伪狂犬病gB蛋白与抗猪伪狂犬病gB蛋白抗体混合,进行亲和层析。
- 将亲和层析后的gB蛋白抗体与磁微粒结合,制备磁微粒标记的gB蛋白抗体。
磁微粒化学发光抗体检测
- 将待测血清与磁微粒标记的gB蛋白抗体混合,进行温育。
- 将温育后的混合液加入化学发光底物,进行化学发光反应。
- 通过酶标仪检测化学发光强度,计算待测血清中猪伪狂犬病gB蛋白抗体的含量。
结果与分析
磁微粒标记gB蛋白抗体的制备
通过亲和层析和磁微粒结合，成功制备了磁微粒标记的gB蛋白抗体，该抗体具有良好的稳定性,适用于猪伪狂犬病抗体检测。
磁微粒化学发光抗体检测方法的性能
本研究建立的磁微粒化学发光抗体检测方法，具有高灵敏度和强特异性，在猪伪狂犬病抗体检测中，该方法与酶联免疫吸附试验（ELISA）相比,具有较高的准确性和可靠性。
应用研究
本研究将磁微粒化学发光抗体检测方法应用于猪伪狂犬病抗体检测，结果表明，该方法在实际应用中具有良好的效果，通过对猪场猪只血清进行检测，可以及时发现猪伪狂犬病抗体阳性猪只,为猪场防控猪伪狂犬病提供了有力支持。
本研究针对T/CVMA 173-2024标准，成功研发了猪伪狂犬病gB蛋白磁微粒化学发光抗体检测方法，该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点，为猪伪狂犬病抗体的检测提供了有力手段，在实际应用中，该方法有助于猪场及时发现猪伪狂犬病抗体阳性猪只，为猪场防控猪伪狂犬病提供有力支持，我们将继续优化磁微粒化学发光抗体检测方法，提高检测灵敏度和特异性,为我国猪伪狂犬病防控工作提供更加有力的技术支持。
