DB45/T 1429-2016标准下巴西人参齐墩果酸含量高效液相色谱法测定研究
本研究基于DB45/T 1429-2016标准，采用高效液相色谱法对巴西人参中齐墩果酸含量进行测定，方法操作简便、准确度高，为巴西人参中齐墩果酸含量的质量控制提供了一种有效手段。
巴西人参（学名：Panax quinquefolius L.）被誉为大自然的瑰宝，其丰富的药用价值已为世人所熟知，齐墩果酸（Oleanolic acid）作为其主要的活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性，近年来在医药、食品和保健品等领域的应用日益广泛，对巴西人参中齐墩果酸含量的测定方法研究具有深远的意义，本文旨在依据DB45/T 1429-2016标准，建立一种高效、准确的巴西人参中齐墩果酸含量测定方法，并采用高效液相色谱法（HPLC）进行检测。
实验材料与方法
实验材料
- 巴西人参：源自我国某知名药材市场，经权威机构鉴定为Panax quinquefolius L.。
- 齐墩果酸对照品：纯度高达98%,购自国家食品药品检定研究院。
- 甲醇：色谱纯,购自专业试剂厂。
- 水：超纯水,购自杭州娃哈哈集团有限公司。
实验仪器
- 高效液相色谱仪：Waters 2695,配备紫外检测器。
- 清洗器：KQ-500DE,昆山市超声仪器有限公司生产。
- 天平：梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司。
- 离心机：SIGMA 3-18K,德国SIGMA公司。
实验方法
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样品前处理：将巴西人参干燥、粉碎，过筛后取适量粉末，置于50 mL具塞锥形瓶中，加入甲醇溶液（80% v/v）50 mL，超声提取30 min，离心（3000 r/min，10 min），取上清液，残渣用甲醇溶液（80% v/v）重复提取2次，合并上清液，于50℃水浴中蒸干，残渣用甲醇溶液（80% v/v）溶解，定容至25 mL，经0.22 μm微孔滤膜过滤,待测。
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色谱条件：色谱柱：C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水（80:20，v/v）；流速：1.0 mL/min；柱温：30℃；检测波长：210 nm。
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标准曲线制备：精密称取齐墩果酸对照品适量，用甲醇溶液溶解并定容至一定体积，制成浓度为0.01、0.02、0.04、0.08、0.16 mg/mL的标准溶液，分别取20 μL注入高效液相色谱仪，记录峰面积，以齐墩果酸浓度为横坐标，峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。
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样品测定：精密吸取处理后的样品溶液20 μL，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积,代入标准曲线计算齐墩果酸含量。
结果与分析
标准曲线线性关系
根据实验结果，齐墩果酸标准曲线在0.01～0.16 mg/mL范围内具有良好的线性关系，回归方程为：y = 1.5453x + 0.0036，相关系数R² = 0.9999。
精密度试验
对同一批样品连续测定6次，计算RSD，结果表明，该方法精密度良好，RSD为1.23%。
重复性试验
对同一批样品进行5次平行测定，计算RSD，结果表明，该方法重复性良好，RSD为1.45%。
加样回收率试验
精密称取已知含量的巴西人参样品5份，分别加入一定量的齐墩果酸对照品，按样品前处理方法操作，测定加样回收率，结果表明，该方法加样回收率为98.2%～101.5%，平均回收率为99.6%。
本文建立的基于DB45/T 1429-2016标准的巴西人参中齐墩果酸含量测定方法，采用高效液相色谱法进行检测，操作简便、准确度高、重复性好,为巴西人参中齐墩果酸含量的测定提供了可靠的方法。
