DB64/T 1605-2019 牛性腹泻/粘膜病酶联免疫吸附试验操作规程详细解析

《DB64/T 1605-2019 牛性腹泻/粘膜病酶联免疫吸附试验操作规程详解》详细介绍了牛性腹泻/粘膜病酶联免疫吸附试验的操作步骤和注意事项，旨在为兽医和实验室工作人员提供准确、可靠的检测方法，以有效预防和控制牛性腹泻/粘膜病的发生。

牛性腹泻与粘膜病（BVD/MD）作为一种极具传染性的疾病，对养牛业构成了巨大的经济损失，为了有效地预防和控制这一疾病，我国制定了《牛性腹泻与粘膜病酶联免疫吸附试验操作规程》（DB64/T 1605-2019），本文将对该规程进行深入解读，旨在帮助相关人员掌握正确操作方法，提升检测效率。

DB64/T 1605-2019规程概览

DB64/T 1605-2019规程是我国首个专门针对牛性腹泻与粘膜病酶联免疫吸附试验的操作规程，该规程的制定旨在规范试验流程，确保检测结果的精确性与可靠性，适用于各级兽医实验室、养殖企业及相关机构。

试验原理

酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种基于抗原与抗体特异性结合的免疫学检测技术，通过检测样品中的抗原或抗体，该试验能够有效判断样品是否感染了牛性腹泻与粘膜病。

试验材料

1. 试剂：包括酶联免疫吸附试剂盒、洗涤液、底物液、终止液、阳性对照、阴性对照、空白对照等。
2. 仪器：酶标仪、微量移液器、微量离心机、恒温培养箱等。
3. 试剂耗材：酶标板、吸头、封板膜等。

试验步骤

1. 样品处理：根据试剂盒说明书，对待检样品进行适当处理，提取抗原或抗体。
2. 添加试剂：将处理后的样品、阳性对照、阴性对照、空白对照分别加入酶标板孔中。
3. 洗板：将酶标板浸泡在洗涤液中，充分振荡，静置1分钟，倒掉洗涤液，重复洗涤3次。
4. 滴加酶联试剂：将酶联试剂滴加到各孔中，轻柔混匀，封板膜。
5. 孵育：将酶标板放入恒温培养箱中，根据试剂盒说明书设定孵育时间。
6. 洗板：重复步骤3，洗涤3次。
7. 滴加底物液：将底物液滴加到各孔中，轻柔混匀，封板膜。
8. 孵育：将酶标板放入恒温培养箱中，根据试剂盒说明书设定孵育时间。
9. 滴加终止液：将终止液滴加到各孔中，轻柔混匀。
10. 检测：将酶标板放入酶标仪中，根据试剂盒说明书设定波长，检测各孔的吸光度值。

结果判定

根据试剂盒说明书提供的阳性对照和阴性对照的吸光度值,以及样品的吸光度值，进行结果判定，若样品的吸光度值大于阳性对照的吸光度值，且小于阴性对照的吸光度值，则判定为阳性；若样品的吸光度值小于阴性对照的吸光度值，则判定为阴性。

注意事项

1. 试验过程中,严格遵守无菌操作原则，防止污染。
2. 根据试剂盒说明书,正确配制试剂，确保试剂质量。
3. 试验操作过程中,注意观察各孔的颜色变化，及时发现问题。
4. 结果判定时,结合临床实际情况进行分析。

DB64/T 1605-2019《牛性腹泻与粘膜病酶联免疫吸附试验操作规程》为我国牛性腹泻与粘膜病的检测提供了权威的操作指南，通过严格遵守该规程，可以有效提升检测结果的准确性和可靠性，为我国养牛业的持续健康发展提供坚实保障。