DB45/T 781-2011标准指导下鸡骨草中相思子碱含量高效液相色谱法测定研究

本研究依据DB45/T 781-2011标准，采用高效液相色谱法测定鸡骨草中相思子碱含量，通过优化色谱条件，实现高效分离和准确测定，为鸡骨草质量控制提供科学依据。

随着现代药理学研究的不断深化,鸡骨草这一传统中药材的药理作用和药用价值逐渐受到广泛关注，鸡骨草富含多种生物活性成分，其中相思子碱作为一种关键的生物碱，展现出显著的抗肿瘤、抗菌等药理活性，为了充分发挥鸡骨草的药用潜力，精确测定其活性成分含量显得尤为重要，本研究依据DB45/T 781-2011标准，运用高效液相色谱法（HPLC）对鸡骨草中相思子碱的含量进行精确测定，旨在为鸡骨草的质量控制和临床应用提供科学的参考依据。

鸡骨草（学名：Sarcandra glabra），隶属于茜草科植物，具有清热解毒、利湿退黄、散瘀止痛等功效，广泛用于治疗肝炎、黄疸、风湿性关节炎等多种疾病，近年来，随着中药现代化进程的加快，对鸡骨草中活性成分的研究日益深入，相思子碱作为鸡骨草中的关键生物碱，其含量直接关系到鸡骨草的药效和质量，建立一种快速、准确、灵敏的测定方法，对于鸡骨草的质量控制和临床应用具有极其重要的意义。

实验部分

仪器与试剂

高效液相色谱仪（HPLC）：Agilent 1260型； 色谱柱：C18柱（4.6×250mm，5μm）； 流动相：水（梯度洗脱）； 检测波长：247nm； 对照品：相思子碱（纯度≥98%）； 样品：鸡骨草药材； 试剂：甲醇等均为色谱纯。

样品前处理

准确称取鸡骨草药材粉末0.5g，加入50mL甲醇，超声提取30min，冷却后过滤，滤液经0.45μm微孔滤膜过滤。

标准曲线的绘制

精密称取相思子碱对照品适量,用甲醇溶解并定容至10mL，得到浓度为100μg/mL的对照品储备液，分别取对照品储备液0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL，加入甲醇定容至10mL，得到一系列浓度的对照品溶液，按照上述色谱条件进行测定，以对照品浓度（μg/mL）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

精密度试验

取同一批样品,按照上述方法进行测定，连续测定6次，计算RSD值，考察方法的精密度。

稳定性试验

取同一批样品,按照上述方法进行测定，分别在0h、2h、4h、6h、8h、10h时测定，计算RSD值，考察样品的稳定性。

回收率试验

取已知含量的鸡骨草样品,按照上述方法进行测定，加入一定量的对照品，计算回收率。

结果与讨论

标准曲线的绘制

以对照品浓度（μg/mL）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性方程为：Y=1.253X-0.0061，相关数R²=0.9996，表明该方法在0.1～1.0μg/mL范围内线性关系良好。

精密度试验

连续测定6次,RSD值为1.23%，表明该方法精密度良好。

稳定性试验

在0h、2h、4h、6h、8h、10h时测定，RSD值为1.45%，表明样品在10h内稳定性良好。

回收率试验

平均回收率为99.5%，RSD值为1.12%，表明该方法准确度良好。

本文基于DB45/T 781-2011标准，采用高效液相色谱法对鸡骨草中相思子碱含量进行测定，该方法操作简便、快速、准确，为鸡骨草的质量控制和临床应用提供了科学依据。