GB/T 21768-2008化学品安全性评价，体外哺乳动物细胞DNA损伤与修复试验方法的探讨与应用

GB/T 21768-2008标准探讨了体外哺乳动物细胞DNA损伤与修复/非程序性DNA合成试验方法在化学品安全性评价中的应用，该方法旨在评估化学品的潜在毒性，为保障人体健康提供科学依据。

随着化学工业的迅猛发展，化学品种类与数量的激增，化学品的安全性评价逐渐成为公众和政府关注的焦点，GB/T 21768-2008《化学品 体外哺乳动物细胞DNA损伤与修复/非程序性DNA合成试验方法》是我国制定的一项关键标准，本文旨在深入探讨该标准的应用背景、试验方法及其在化学品安全性评价中的重要作用。

应用背景

DNA损伤与修复是生物体内不可或缺的生物学过程，它能够抵御外界有害因素的影响，保护细胞不受损害，某些化学物质可能通过诱导DNA损伤并抑制DNA修复，导致细胞遗传信息的改变，进而引发突变和肿瘤等疾病，对化学品的DNA损伤与修复能力进行评价,对于评估其潜在的致癌性和致突变性具有重要意义。

GB/T 21768-2008标准明确了体外哺乳动物细胞DNA损伤与修复/非程序性DNA合成试验方法，旨在通过检测化学物质对细胞DNA损伤和修复能力的影响,从而评估其潜在的毒性。

试验方法

细胞培养

选择合适的哺乳动物细胞，如仓鼠肺细胞（V79细胞）或人胚胎肾细胞（HEK293细胞）,在适宜的培养条件下进行培养。

化学物质处理

将细胞分为对照组和实验组，对照组细胞不进行化学物质处理，实验组细胞加入一定浓度的化学物质处理,处理时间根据化学物质的性质和预期毒性进行设定。

DNA损伤与修复检测

1. DNA损伤检测：采用彗星试验（Comet assay）检测细胞DNA的损伤程度，将处理后的细胞与低熔点琼脂糖混合，制成细胞琼脂糖凝胶，在碱性条件下进行电泳,观察细胞核DNA的迁移情况。

2. DNA修复检测：采用非程序性DNA合成（NPS）试验检测细胞DNA的修复能力，将处理后的细胞与放射性标记的胸腺嘧啶核苷（[3H]TdR）共培养，通过检测放射性标记物在细胞DNA中的掺入量,评估细胞DNA的修复能力。

数据分析

对实验结果进行统计分析，与对照组相比,实验组细胞的DNA损伤程度和DNA修复能力是否存在显著差异。

在化学品安全性评价中的作用

1. 致癌性：通过检测化学物质对细胞DNA损伤和修复能力的影响,可以初步评估其潜在致癌性。

2. 评估致突变性：DNA损伤与修复是细胞发生突变的重要环节,通过该试验方法可以评估化学物质对细胞DNA的致突变性。

3. 辅助风险评估：结合试验方法，如遗传毒性试验、毒性试验等,可以更全面地评估化学物质的安全性。

4. 优化筛选程序：在化学品研发过程中，该试验方法可以作为筛选候选化合物的重要手段,提高研发效率。

GB/T 21768-2008标准在化学品安全性评价中具有举足轻重的地位，通过该试验方法，可以有效地评估化学物质的DNA损伤与修复能力，为化学品的研发、生产和应用提供科学依据，在实际应用中，还需结合试验方法，考虑化学物质的毒理学特性,以全面评估其安全性。