枸杞总黄酮含量高效液相色谱法测定研究

团体标准 601
本研究采用高效液相色谱法,依据DB64/T 1139-2015标准,对枸杞中总黄酮含量进行测定,实验结果表明,该方法具有操作简便、准确度高、重复性好等优点,为枸杞中总黄酮含量的测定提供了可靠的技术手段。

枸杞(学名:Lycium barbarum L.)作为我国传统中药材,蕴含着丰富的营养成分和多样的药用价值,枸杞中的总黄酮类化合物以其抗氧化、抗衰老、抗炎、抗肿瘤等多重生物活性而备受关注,测定枸杞中总黄酮的含量,对于评估其品质和药用价值具有至关重要的意义,依据DB64/T 1139-2015《枸杞中总黄酮含量的测定》标准,采用高效液相色谱法对枸杞中总黄酮含量进行测定,已成为业内共识,本文旨在深入探讨此方法在枸杞总黄酮含量测定中的应用,以期为枸杞的质量监管和市场流通提供有力的技术保障。

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实验材料与方法

实验材料

  • 枸杞样品:市场购买,符合DB64/T 1139-2015标准要求。
  • 试剂与仪器:甲醇、乙醇等试剂均为分析纯;高效液相色谱仪、紫外检测器、色谱柱、天平等。

实验方法

  1. 样品前处理:将枸杞样品粉碎,过40目筛,准确称取0.5g,置于50mL具塞锥形瓶中,加入10mL甲醇,超声提取30min,冷却至室温,用滤纸过滤,收集滤液。
  2. 标准曲线绘制:准确移取0.1mg/mL的总黄酮标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,分别置于10mL容量瓶中,加入2.5mL甲醇,定容至刻度,混匀,以总黄酮浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。
  3. 色谱条件:色谱柱:C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-0.4%铝溶液(体积比70:30);流速:1.0mL/min;检测波长:360nm;柱温:室温。
  4. 样品测定:准确移取样品溶液2.0mL,按照上述色谱条件进行测定,记录峰面积。

结果与分析

标准曲线

以总黄酮浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得线性方程为:y=2.6243x-1.8456,相关系数R²=0.9998。

精密度试验

对同一批次样品进行6次测定,RSD为1.2%,表明该方法精密度良好。

重复性试验

对3个不同批次样品进行测定,RSD为1.5%,表明该方法重复性良好。

加样回收率试验

对样品进行加样回收率试验,平均回收率为98.6%,RSD为1.3%,表明该方法准确度良好。

本文采用DB64/T 1139-2015标准中的高效液相色谱法测定枸杞中总黄酮含量,结果显示该方法操作简便、准确度高、精密度好、重复性好,为枸杞的质量控制和市场流通提供了有力的技术支持。

改进方向

随着枸杞研究的不断深入,枸杞中总黄酮含量的测定方法也将不断优化,以下几方面可作为改进方向:

  1. 探索更快速、高效的样品前处理方法,提高检测效率。
  2. 优化色谱条件,提高检测灵敏度。
  3. 研究不同产地、不同品种枸杞中总黄酮含量的差异,为枸杞的品种选育和种植提供依据。
  4. 结合检测技术,如质谱联用等,对枸杞中总黄酮进行更深入的研究。