DB64/T 1516-2017标准下犬源性成分实时荧光PCR检测法应用研究

本文探讨了基于DB64/T 1516-2017标准的肉及肉制品中犬源性成分定性检测方法——实时荧光PCR法的应用，该方法具有较高的灵敏度和特异性，为保障食品安全提供了有力支持，研究结果表明，实时荧光PCR法在肉及肉制品中犬源性成分检测中具有广泛的应用前景。

随着我国人民生活水平的持续提升，公众对食品安全的关注度亦日益增强，肉类及其制品作为国民饮食结构中的重要组成部分，其品质直接关系到消费者的健康安全，近年来，肉及肉制品中犬源性成分的掺杂事件时有发生，这不仅侵犯了消费者的合法权益，也严重威胁了食品安全，为此，我国正式颁布了DB64/T 1516-2017《肉及肉制品中犬源性成分定性检测方法》标准，其中实时荧光PCR技术被广泛用于犬源性成分的定性检测,本文将深入探讨实时荧光PCR技术在肉及肉制品中犬源性成分定性检测中的应用。

实时荧光PCR法的原理及优势

实时荧光定量PCR（Real-time Quantitative PCR，RT-qPCR）技术是一种先进的分子生物学检测手段，通过实时监测PCR反应过程中荧光信号的强度，实现对靶标DNA或RNA的定量分析,实时荧光PCR技术具有以下显著优势：

1. 灵敏度高：该技术能够检测到极低浓度的目标DNA或RNA,满足肉及肉制品中犬源性成分的精准检测需求。
2. 特异性强：实时荧光PCR技术具有高度特异性，能够有效区分犬源性成分与其他动物源性成分,确保检测结果的准确性。
3. 操作简便：该技术操作简便快捷,适合大批量样品的检测。
4. 自动化程度高：实时荧光PCR技术可以实现检测过程的自动化,提高检测效率。

实时荧光PCR法在肉及肉制品中犬源性成分定性检测中的应用

样品处理

在检测肉及肉制品中犬源性成分之前，首先需要对样品进行适当的处理,具体步骤如下：

1. 样品制备：将肉及肉制品样品进行均质化处理,以提取其中的DNA。
2. DNA提取：采用化学或酶法提取样品中的DNA。
3. DNA纯化：对提取的DNA进行纯化,去除杂质。

实时荧光PCR检测

将纯化后的DNA作为模板，利用实时荧光PCR技术进行犬源性成分的定性检测,具体操作如下：

1. 设计特异性引物和探针：针对犬源性成分设计特异性引物和探针,确保检测结果的准确性。
2. PCR反应：在PCR反应体系中加入模板DNA、引物、探针、dNTPs、Taq酶等,进行PCR扩增。
3. 实时荧光检测：在PCR反应过程中，实时监测荧光信号的强度,根据荧光信号的变化判断目标DNA的存在。

结果分析

根据实时荧光PCR检测结果，可以判断肉及肉制品中是否含有犬源性成分，当荧光信号达到预设阈值时，表示样品中含有犬源性成分；反之,则表示样品中不含有犬源性成分。

实时荧光PCR技术作为一种高效、灵敏、特异的检测技术，在肉及肉制品中犬源性成分的定性检测中具有广阔的应用前景，根据DB64/T 1516-2017标准，实时荧光PCR技术能够有效保障肉及肉制品的质量安全，为消费者提供更加放心的食品，随着实时荧光PCR技术的不断发展和完善,其在肉及肉制品中犬源性成分检测领域的应用将更加广泛。